本期课程安排

第一天上午9:00-12:00  下午13:00-17:00

第一讲、CRISPR/Cas9基因组编辑技术的工作原理

1、基因组靶向修饰技术发展简史（从基因打靶到基因编辑）   2、CRISPR/Cas9基因组编辑技术的工作原理        

第二讲、CRISPR的设计

1、CRISPR设计的依据及原则    2、常用CRISPR设计软件简介（CRISPR的在线设计简介）   3、靶向编辑基因的基因型确认及CRISPR的再设计

休息与答疑

第三讲、CRISPR/Cas9基因组编辑工具的制备及向细胞内的递送策略

1、DNA形式的基因组编辑工具的制备与递送   2、RNP形式的基因编辑工具的制备与递送

第四讲、sgRNA活性验证

1、插入缺失（Indel）突变检测的基本策略  2、基于胚胎反应器的活性验证方法 3、基于细胞系的活性验证方法

休息与答疑

第五讲、利用CRISPR技术创制哺乳动物基因组编辑细胞系

1、基因敲入（如点突变和报告基因等）的供体设计原则及实例分析    2、基因组编辑工具导入细胞系的方法（转染与转导）   3、基因组编辑细胞系的筛选及基因型的快速确认      4、基因编辑子的功能确认策略

第二天上午9:00-12:00     下午13:00-17:00

第六讲、利用CRISPR技术创建基因敲除或敲入动物突变体（斑马鱼基因组编辑突变体的制作）

1、RNP基因组编辑工具（和供体）递送至受精卵  2、初建者（F0）体细胞携带靶向突变等位基因的鉴定    3、基因组编辑突变体的筛选及建系（F1）  4、基因编辑子的功能确认策略  

第七讲  利用CRISPR技术创建基因敲除或敲入植物、真菌 和 细菌突变体

1、基本过程     2、基因组编辑工具的制作    3、基因组编辑工具的递送      4、基因组编辑突变体（F1）的筛选及建系     5、基因敲除/敲入的功能确认

休息与答疑

第八讲、CRSIPR/Cas9基因组编辑技术的脱靶问题

1、脱靶的产生原因    2、脱靶检测   3、解决脱靶问题的方法  4、脱靶问题对不同领域研究者的意义

第九讲、利用CRISPRi或CRISPRa技术调控基因在细胞或胚胎中的表达

1、dCas9的特征简介   2、运用CRISPR技术调控基因在细胞或胚胎中表达的基本实验过程   3、CRISPR技术的转录抑制  4、CRISPR技术的转录活化   5、碱基编辑技术   6、核酸检测

休息与答疑

第十讲、斑马鱼模型在评价突变基因与疾病发生关系中的应用

1、科学问题的提出    2、与疾病共分离的遗传突变的常见类型   3、评价人突变基因的斑马鱼模型的建立（CRISPRi法基因敲降法、CRISPR法基因敲除、或过表达）    4、斑马鱼模型表型模拟人类疾病临床特征（显微形态学、组织学、转录组学）     5、利用斑马鱼模型解析疾病发生机制研究的一般策略

第十一讲 “基因编辑婴儿”事件及CRISPR技术的伦理学问题

1、 “基因编辑婴儿”事件    2、新型基因组编辑技术的发展   3、基因组编辑技术的应用  4、基因组编辑技术应用的伦理学问题